第六辑 组织培养

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运用生物工程技术——组织培养法繁育名贵品种试管苗已成功。
(1)腋芽的培养:从腋芽上剥取2—3mm长的生长点接种到附加0.2—1.0mg/c,0.5
—1.0mg/c,0.1—0.5mg/c的MS培养基上,接种后15—20天,外植体先膨大并肉质化,
尔后在基部周围逐渐形成愈伤组织,经28—35天基部愈伤组织分化出芽。
(2) 嫩叶和叶柄的培养:将嫩叶切成 1×1cm的小块,叶柄切成1—2cm
长的段放在附加LH(500mg/L)、BA(2.0mg/L)和NAA(0.1—0.5mg/L)的MS培养基上培养。
嫩叶块经25—30天,叶柄切段经15—20天,从切口处先开始形成愈伤组织。将愈伤组
织再转移到添加AA(0.2—0.5mg/L) 和BA(2.0mg/L)的新鲜MS基本培养基上培养,分化
出不定芽丛。
(3) 丛生芽的继代培养:将以上分化出的芽丛分割,在原培养基上经1—2个月的
培养,又可产生半圆球形的芽丛布满愈伤组织。一般隔两个月可继代培养一次。这样
一个芽经一年培养可得到5000—10000株试管苗。
(4) 丛生芽的伸长及根的诱导:将小芽丛转移到附加BA(0.5—2.0mg/L),GA(0.2
—0.5mg/L)的MS培养基上,25—35天后,芽可长到3—4cm高。
为诱导不定芽生根, 把伸长的牙丛基部切下投入到50—100PPA/AA,NAA和IBA的
溶液中处理2—3小时,再转入加 2%蔗糖和0.5%活性炭,而大量元素浓度减半
的MS培养基中,或直接将切下的小苗转入加有IAA、NAA和IBA(0.1—0.2mg/L) 的上述
生根培养基中诱导生根。 7天后在基部即可形成锯齿状凸起,15天后可长出白嫩粗壮
的短根,28—35天即可形成良好的根系。
(5) 试管苗移栽:在牡丹试管苗诱导出2—3条根,并长到3—4cm时即可移栽。先
将瓶塞打开放在阳光充足通风处晾苗3—4天,取出植株,用温水冲去琼脂,直接栽到
沙质的中性壤中, 栽后用烧杯盖上,7天后可揭杯晾苗,如土壤干应浇水,15天后可
去掉烧杯,小苗即能成活并正常生长。
组织培养法是牡丹生产区快速繁育名贵稀有品种或培养优良单株的一个有效手段。